> Novaĵoj > Industria Novaĵoj

Kial ĉelkulturo unue lizas ruĝajn globulojn?

2022-12-23

Baza enkonduko
Eritrocita lisato estas unu el la plej simplaj kaj facilaj metodoj por forigi ruĝajn globulojn, tio estas, disigi ruĝajn globulojn per lisato, kiu ne difektas nukleajn ĉelojn kaj povas plene forigi ruĝajn globulojn. Lisata fendetaĵo estas milda forigo de ruĝaj globuloj, kiu estas ĉefe uzata por disiĝo kaj purigo de histoĉeloj disigitaj per enzima digesto, disigo kaj purigo de limfocitoj kaj forigo de ruĝaj globuloj en la eksperimentoj de histoproteino kaj nukleo. acida eltiro. La histoĉeloj akiritaj per la lisato de ruĝaj globuloj ne enhavas eritrocitojn, kaj povas esti plue uzataj por primara kulturo, ĉelfuzio, fluocitometrio, apartigo kaj eltiro de nuklea acido kaj proteino, ktp.

Instrukcioj por uzo
Specimeno de histoĉelo
1. Freŝaj histoj estis digestitaj per pankreato/enzimo aŭ kolagenazo kaj disigitaj en unuĉelan suspendon, kaj la supernatante estis forĵetita per centrifugado.

2. Prenu ELS-lysate el la fridujo je 4â, aldonu ELS-lysate al ĉela precipitaĵo en proporcio de 1:3-5 (aldonu 3-5ml da lysate al 1ml da ĉelo kompaktigita), milde blovu kaj miksi.

3. Centrifugu je 800-1000rpm dum 5-8 minutoj kaj forĵetu la supran ruĝan klaran likvaĵon.

4. La precipitita parto estis kolektita kaj centrifugata per la solvaĵo de Hank aŭ serum-libera kultursolvo 2-3 fojojn.

5, se la fendado ne estas kompleta/kompleta, oni povas ripeti paŝojn 2 kaj 3.

6. Resupendaj ĉeloj por postaj eksperimentoj; Se RNA estas ĉerpita, estas plej bone fari tion en la solvo preparita de Paŝo 4 uzante DEPC-akvon

Ruĝaj globuloj havas tre mallongan vivociklon, nur 120 tagojn, sed ili reproduktas sangon tre rapide, kaj en ĉi tiu kazo ili estas precipe kapablaj je ĉeldivido, kaj ili estas la plej rapidaj dividantaj ĉeloj el ĉiuj, do ĉi tiu ĉelo estas tre valora, do ĝi estas tre utila por ĉelkulturo. Ĝi estas tre simpla, ĝi havas neniujn organetojn en ĝi, nur ĉelmembranojn kaj proteinojn.

Antaŭa:Kio estas la funkcioj de ELISA ilaro?

Poste:Reakciaĵpostuloj kaj baza reprezentado de solvkoncentriĝo.